說(shuō)到滅菌柜,相信大家都有聽(tīng)說(shuō)過(guò),但是至于滅菌柜究竟有哪些滅菌的方法,相信很多人就都不是很清楚了吧,下面環(huán)宇小編給大家整理了滅菌柜有哪些滅菌法以及滅菌柜的產(chǎn)品試驗(yàn)的相關(guān)內(nèi)容。
(1)煮沸法:煮沸100℃,5分鐘,能殺死一般細(xì)菌的繁殖體。許多芽胞需經(jīng)煮潮5~6小時(shí)才死亡。水中加入2%碳酸鈉,可提高其沸點(diǎn)達(dá)105℃。既可促進(jìn)芽胞的殺滅,又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可用于飲水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。
(2)流通蒸汽滅菌法:利用100℃左右的水蒸汽進(jìn)行消毒,一般采用流通蒸汽滅菌器(其原理相當(dāng)于我國(guó)的蒸籠),加熱15到39分鐘,可殺死細(xì)菌繁殖體。消毒物品的包裝不宜過(guò)大、過(guò)緊以利于蒸汽穿透。
(3)間歇滅菌法:利用反復(fù)多次的流通蒸汽,以達(dá)到滅菌的目的。一般用流通蒸汽滅菌器,100℃加熱15~30分鐘,可殺死其中的繁殖體;但芽胞尚有殘存。取出后放37℃孵箱過(guò)夜,使芽胞發(fā)育成繁殖體,次日再蒸一次,如此連續(xù)三次以上。本法適用于不耐高溫的營(yíng)養(yǎng)物(如血清培養(yǎng)基)的滅菌。
(4)巴氏消毒法(Pasteurization):利用熱力殺死液體中的病原菌或一般的雜菌,同時(shí)不致嚴(yán)重?fù)p害其質(zhì)量的消耗方法。由巴斯德創(chuàng)用以消毒酒精類,故名。加溫61.1~62.8℃半小時(shí),或71.7℃15~30秒鐘。常用于消毒牛奶和酒類等。
(5)高壓蒸汽滅菌法:壓力蒸汽滅菌是在專門(mén)的壓力蒸汽滅菌器中進(jìn)行的,是熱力滅菌中使用普遍、效果可靠的一種方法。其優(yōu)點(diǎn)是穿透力強(qiáng),滅菌效果可靠,能殺滅所有微生物。 目前使用的壓力滅菌器可分為兩類:下排氣式壓力滅菌器和預(yù)真空壓力滅菌器。適用于耐高溫、耐水物品的滅菌。
(1) 根據(jù)試驗(yàn)要求,制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和芽孢樣片。
(2) 每次試驗(yàn)取 2 個(gè)菌片為一組,平放于無(wú)菌平皿內(nèi),勿重疊。加蓋,分置于滅菌柜的各層,內(nèi)、中、外不同部位。試驗(yàn)時(shí),滅菌柜內(nèi)除菌片樣本外,還應(yīng)滿載以模擬的常規(guī)處理物品。
(3) 關(guān)閉柜門(mén),開(kāi)啟電源,按滅菌柜設(shè)計(jì)程序進(jìn)行滅菌。滅菌完畢,取出平皿,將菌片取出接種于含 5.0ML 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管中,置 37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)作定性培養(yǎng)。72 H 后觀察結(jié)果?!∪鉁芑鞚嵴弑硎居芯L(zhǎng), 判為陽(yáng)性; 肉湯管澄清者表示無(wú)菌生長(zhǎng), 繼續(xù)培養(yǎng)至第 7 D, 若仍無(wú)菌生長(zhǎng),判為陰性?!?duì)難以判定的肉湯管,取其中 0.2ML 懸液接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,用滅菌 L 棒涂布均勻,置 37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。48 H 后涂片染色,在顯微鏡下觀察菌落形態(tài),或進(jìn)一步做其他試驗(yàn),以判斷生長(zhǎng)者是否為試驗(yàn)菌。若有非試驗(yàn)菌污染,應(yīng)查找原因重新進(jìn)行試驗(yàn)。
(4) 測(cè)試中,應(yīng)同時(shí)設(shè)立定性和定量陽(yáng)性對(duì)照組(菌片對(duì)照)與陰性對(duì)照組(培養(yǎng)基對(duì)照)。
(5) 定量陽(yáng)性對(duì)照組,以同批試驗(yàn)用菌片放在室溫下,待試驗(yàn)組滅菌接種后,立即將該菌片 2 片分別移入含 5.0ML PBS試管中,各振蕩 80次洗滌。進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。
(6) 定性陽(yáng)性對(duì)照組,以同批試驗(yàn)用菌片放在室溫下,待試驗(yàn)組滅菌接種后,立即將試驗(yàn)菌片 2 片,分別接種于 5.0ML 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),觀察有細(xì)菌生長(zhǎng)情況。
(7) 陰性對(duì)照組,以空白樣片 2 片,分別接種于 5.0ML 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,同時(shí)將未接種過(guò)的營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。
(8) 試驗(yàn)重復(fù) 5 次。
(9) 在 5 次試驗(yàn)中,每次試驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照菌片的回收菌量均應(yīng)達(dá)5×`10^5` CFU/片~5×`10^6`CFU/片;定性陽(yáng)性對(duì)照組,細(xì)菌生長(zhǎng)良好;陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。陽(yáng)性或陰性對(duì)照若有不符合上述要求的結(jié)果,試驗(yàn)作廢,重新進(jìn)行。